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根据基因组序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)得到了红色红曲菌中组蛋白去乙酰化酶mrsir2基因的完整cDNA序列,其编码序列(coding sequence,CDS)为1539 bp,编码512个氨基酸,含有一个SIR2蛋白保守结构域。根据大肠杆菌的密码子的偏好性对mrsir2序列进行优化,优化后的序列与p ET-28b载体连接后转入宿主菌E.coli BL21中进行IPTG诱导表达,并优化表达条件。实验结果表明:在16℃条件下用终浓度为0.25 mM的IPTG诱导培养16 h后,目的蛋白Mr Sir2可溶性表达效果良好。Ni2+柱亲和层析纯化后的Mr Sir2重组蛋白在SDS-PAGE上显示为一条约75 ku大小的条带,蛋白定量浓度达1.97 mg/mL,经Western blot鉴定为目的蛋白,测定酶活为78.5(OD/min/mg),780μM的二氢香豆素(dihydrocoumarin,DHC)对Mr Sir2蛋白的酶活抑制率为47%。Mr Sir2蛋白的可溶性表达为全面了解其酶学特征提供了材料,也为体外分析蛋白相互作用奠定了基础。 相似文献
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锡工业是国内重要产业有色金属门类的一大产业,每年都向环境排放许多污染物。随意排放的锡渣中含有的铅进入土壤随雨水排入水体,引起水体的污染,人、畜饮用了含铅的水,由消化道引起铅中毒。若用含铅水灌溉,将使农作物中铅富集,由食物进入人体。铅蓄积在人体骨骼中,会对人体的血液系统、免疫系统、消化系统、神经系统等产生影响。文章针对上述问题提出一种解决锡焊焊台的锡焊过程中环境污染的节能减排优化设计技术,应用于实验室,电子类学生及在职人员,可有效解决焊锡渣管理不当随生活垃圾排放造成污染,锡焊过程产生对人体有害的废气等问题,减少对环境的污染并保护使用者的身体健康,具有良好的减排效益,同时具有一定的节能效果。 相似文献